Table Of Content昆 虫 学 报 !"#$%&#’(’)’*+"$,+&+"$，!"#$%&$’())*，+（, (）：,-./,-0 1223)-+-45(05
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栎旋木柄天牛高毒力球孢白僵菌菌株的筛选
刘玉军,，张龙娃,，何亚琼,，王 滨,，!，丁德贵(，李增智,
（,M 安徽农业大学微生物防治省重点实验室，合肥 (.)).5；(M 安徽省林业有害生物防治检疫局，合肥 (.))),）
摘要：栎旋木柄天牛 !-./’0+1+2(1$2#3/+是近年来在安徽黄山风景区大面积暴发的危险性林业有害生物之一，其发
生危害已经严重影响了风景区自然与生态景观。本研究选择分离自不同天牛成虫的*个球孢白僵菌 43$253/+$
6$11+$&$菌株，依据菌落形态、菌株生长速度、产孢量、萌发率、抗旱力和产胞外蛋白酶水平等生物学性状进行初步筛
选。在此基础上，筛选出生物学性状优良菌株N#()(、N#5-5和N#,*0*，并进一步对栎旋木柄天牛幼虫进行生物测
定。基于此种筛选模式的菌株筛选方法筛选出了具有菌落生长速度快、萌发率高、产孢和抗旱能力强、胞外蛋白酶
产酶水平高及毒力强的球孢白僵菌 N#()( 菌株。该菌株对栎旋木柄天牛的校正死亡率达 0(M*O，侵染率达
0.M.O，在浓度为,P,)8QDR时的半致死中时仅为+M*5天，显示出对目标天牛的极强毒力，在栎旋木柄天牛的生物
防治中将有重要的应用价值。
关键词：栎旋木柄天牛；球孢白僵菌；生物学特性；生物测定；菌株筛选
中图分类号：S05+ 文献标识码：9 文章编号：)-+-45(0（5 ())*）)(4),-.4)8
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栎旋木柄天牛 !-./’0+1+2( 1$2#3/+ 是国家林业局 要危害细叶青冈栎 723/"21 (8/1+&$39’)+$、青冈栎
()).年首次发布的重要的危险性林业有害生物。 :8"+’6$)$ &’-1+1 等栎属植物，每年造成大面积树木枯
该天牛近年来在安徽黄山风景区发生十分严重，主 死，给景区的森林植被造成很大破坏，严重影响了景
基金项目：国家自然科学基金重点项目（.)..)+))）；安徽高校省级自然科学研究重点项目（67())8)*）；安徽省自然科学基金项目（)8)-,,),(）；
黄山风景区管委会栎旋木柄天牛防治课题（横向课题）
作者简介：刘玉军，男，,0*,年生，安徽芜湖人，硕士研究生，研究方向为昆虫真菌学和化学生态学
!通讯作者 9%:;<$=<$><$$"?@<AB"A>"，C4D&EF：#G&AHI&;&%J"B%J>A
收稿日期 K">"EL"B：())84)*4,+；接受日期 9>>"@:"B：())*4),4)(
%;; 昆虫学报 .("#6’"&*&$&02(#72’2(# 0%卷
区的自然与生态景观。栎旋木柄天牛以幼虫蛀食树 验中所采用的’株球孢白僵菌菌株的寄主均为天牛
干边材，初龄幼虫由枝的顶端向下蛀食，其蛀道长达 （表%）。
!"" #$左右，老龄幼虫在化蛹前环绕枝干蛀食，使
表! 供试球孢白僵菌菌株的寄主及原始采集地
寄主环蛀处以上部分脱水枯死；寄主植物一旦遭受
#$%&’! #(’()*+*$,-)./0/,$&&)1$&/+/’*)2+(’
危害，轻者会引起风折，严重的将造成整株死亡。由
+’*+’-*+.$/,! )2 "#$%&#’($)$!!($*$
于栎旋木柄天牛生活史的隐蔽性，在危害初期不易 菌株 寄主 原始采集地
被发现，加大了监测和防治难度，一旦出现明显的被 +9-3/2= ()=9= ?-/./23@@)#3@/9/,=
AB"% 木麻黄星天牛 .’&/$&/)&-#()2’!’,2, 广东 C832.4)2.
害状，树木已失去利用价值及有利的防治时机。文
AB:5 光肩星天牛 .’&/$&/)&-#0$#1-2/!’’2, 北京 A,/D/2.
献记载该天牛仅在台湾省阿里山有分布，后来，在山 AB!"! 松褐天牛 %&’&()#*+,#$"!-’#"+, 日本 E3F32
东、广西、河南和江西一部分山区也发现有此类天牛 AB!": 光肩星天牛 .* 0$#1-2/!’’2, 日本 E3F32
AB:&’ 松褐天牛 %* #$"!-’#"+, 安徽黄山(832.=632，G268/
（刘世儒和郭树嘉，%&’&；俞云祥，!""!）。黄山风
AB5;5 松褐天牛 %* #$"!-’#"+, 安徽黄山(832.=632，G268/
景区是全国著名风景名胜区，也是世界自然与文化 AB%;;’ 松褐天牛 %* #$"!-’#"+, 安徽黄山(832.=632，G268/
遗产，为避免环境污染、保护生物多样性，不宜采取 AB%’&’ 栗山天牛 %#,,2(+,-#55!2 安徽黄山(832.=632，G268/
过多的化学防治。因此，选择适宜的替代防治手段 !"3 培养基
显得十分必要。 HHIG培养基（成分：马铃薯!"" .，葡萄糖:" .，
昆虫病原真菌能持续控制害虫的特点及在多种 琼脂 !" .，酵母 %" .，水 % """ $J）。+IGK 培养基
农林害虫防治上的成功应用（() !" #$*，!""!；+,-./) （成分：葡萄糖;" .，琼脂!" .，酵母%" .，蛋白胨%"
!" #$*，!""0；1,-2324)，!""5），为此种危险性天牛的 .，水% """ $J）。
生物防治提供了新的途径。研究证明，利用合适的 !"4 不同菌株生物学特性的研究
真菌 杀 虫 剂 剂 型 能 有 效 地 降 低 松 墨 天 牛 !"4"! 菌落生长性状观察：将灭菌的 HHIG培养基
%&’&()#*+, #$"!-’#"+,、光 肩 星 天 牛 .’&/$&/)&-# 冷却至;0L M0"L，取%0 $J置于直径& #$的培养
0$#1-2/!’’2,等多种天牛的种群密度，并将之长期控 皿中。在无菌条件下，将供试菌株点接于 HHIG 培
制在较低的水平（+6/$378 324 +39)，!"":；+6/$378， 养基的平皿中，每菌株:个重复，恒温!0L N%L培
!"";；<6)$3= !" #$*，!"";）。在所有的昆虫病原真 养，每天观察菌落的生长、色泽、形态和产孢等情况，
菌中，球孢白僵菌 3!#+4!-2# 1#,,2#’# 应用最为广泛。 在培养第>天、%"天和%;天时采用十字交叉法测量
据记载，该菌能侵染%0个目 %;&个科的 >""多种昆 菌落生长直径。
虫（蒲蛰龙和李增智，%&&5）。广泛的寄主谱是由于 !"4"3 产孢量测定：在培养基上培养 %; 天的菌
不同的球孢白僵菌菌株能侵染不同的寄主昆虫，具 落，用直径为%: $$的打孔器从每一菌落的中心点
有不同的寄主专化性。同时，有研究指出不同的菌 至边缘距离的 %O! 处打孔截取小菌块，每菌株 : 个
株间生物学特性也存在一定差异（孙继美等，%&&5； 重复。然后放入0" $J三角瓶中，加"P"0Q吐温R’"
王成树等，%&&&；张立钦等，!"""）。因此，利用球 水溶液!" $J，经磁力搅拌器搅拌%" $/2，获孢子悬
孢白僵菌防治栎旋木柄天牛首先就要筛选出对此天 浮液。用微量移取器从三角瓶不同层面吸取!"" J
!
牛具有高致病力的菌株，但目前尚未见有关菌株筛 孢子悬浮液，滴在血球计数板上，在显微镜下观察计
选报道。为探讨使用白僵菌防治栎旋木柄天牛的有 数。
效途径，本实验研究了球孢白僵菌生物学性状和毒 !"4"4 孢子萌发率及抗旱力测定：用"P"0Q吐温R
力等指标，筛选出对栎旋木柄天牛具有强致病力的 ’"溶液把菌株的孢子从菌落表面洗脱，在显微镜下
菌株，为以后的野外大规模防治奠定了基础。 观察，配成%P"S%"5O$J的孢子悬浮液，用微量移取
器吸取%0 J滴在 !Q琼脂的载玻片上。每菌株 5
!
! 材料与方法 个重复，置于 !0L N%L下培养。!; 6 后在显微镜
下取%"个不同视野镜检萌发率。
!"! 供试昆虫与菌株 抗旱力测定是将上述孢子悬浮液涂于载玻片
栎旋木柄天牛幼虫采自安徽黄山风景区，在室 上，迅速晾干，置于不同浓度盐酸溶液控制的相对湿
内饲养 ! 天后，选择健康、整齐的 0 龄幼虫用于试 度分别为0"Q、>0Q和%""Q的密闭环境中，!; 6后
验。考虑到昆虫病原真菌对寄主昆虫的专化性，实 镜检萌发率。
>期 刘玉军等：栎旋木柄天牛高毒力球孢白僵菌菌株的筛选 /A6
!"#"$ 胞外蛋白酶含量测定：参照 !"#$%&’( 和 头天牛幼虫。采用浸渍法接种，将试虫在/:/428;<
)&(%&(*$+,"(-（. /012）的方法。平板由 /345的明胶 孢子悬浮液中浸 / .进行接种，对照浸沾 43465吐
和/365的琼脂（均为 789）配成。各菌株配成 /: 温L14溶液。接种后的天牛单头放入盛有新鲜青冈
/418;<的孢子悬浮液。用微量移取器取/4!<点滴 栎木屑的养虫杯（上口直径 //36 %;，下口直径 /4
在平板上，每个菌株重复 = 次，>6? @ /?下培养 A %;，高 1 %;）内，每个菌株重复 /6 次，置于 >6? @
天后，用/65（789）的 BCDE 溶液处理平板。菌落 /?培养箱内饲养，用浸有无菌水的湿棉球在杯内保
>
周围显现出清晰的透明环后，倒去 BCDE 液。用游 湿>A &，次日将棉球移出，并在盖上打 6个直径为 >
>
标卡尺测量纵横两个方向的透明环直径及菌落直 ;;的小孔。隔日更换木屑，第 F 天开始，每天定时
径，以透明环与菌落直径之比的平均值作为胞外蛋 观察、记录各处理的死亡情况，并将死虫移出放在盛
白酶产酶量的指示值。 有已灭菌湿滤纸的培养皿内的载玻片上，>6? @/?
!"$ 生物测定 保湿培养，死亡昆虫均镜检记数，持续观察 /6 天。
!"$"! 菌液的准备：将生物学性状测定结果良好 并统计幼虫死亡率、侵染率和半致死时间<M 。
64
的F株菌株（!G>4>，!G=A=和 !G/101）用于进一步的
生物测定。将F株供试菌株的孢子悬浮液涂布在铺 % 结果和分析
有玻璃纸的 HIJK 平板上，>6? @ /?恒温培养 /4
天，待其充分产孢后将玻璃纸上的孢子粉刮下，称取 %"! 生物学特性研究
约>4 ;C孢子粉并充分分散在 43465的吐温L14 溶 %"!"! 培养形态：供试 1 个菌株在 NNIJ 培养基
液中，待孢子全部被打散均匀后，用双层纱布过滤， 上，外观形态差异较大，大致可分为F种类型：菌落
或低速离心>4 ;"-，弃去杂质和培养基残物，得到纯 疏松型（J 型）、菌落紧密型（! 型）和菌落粉状（D
孢子悬浮液，血球记数板测定含孢量，配制成终浓度 型）。菌丝生长快、产孢早且孢子层厚的菌株都集中
为/:/428;<的孢子悬浮液。 在D型中，菌丝生长缓慢、产孢少的菌株多集中在 J
!"$"% 测定方法：每一菌株为 /处理，以 43465的 型，而 ! 型在生长速度与产孢方面介于两者之间
吐温L14溶液作对照，每个处理设 F 重复，每重复 6 （表>）。
表% 不同菌株在&&’(培养基上的形态特征
)*+,-% ./,/012/345/,/678*,85*3*89-37:978:/;95-9-:9-<:93*70:/0&&’(2-<7=2
菌株 类型 菌落色泽 菌落形态 基质色泽
H*,("-. MOPQ D$E$-O%$E$, D$E$-O;$,P&$E$CO R(*,"S%$E$,
!G4/ J 白色7&"*Q 绒毛状9"EE$+.LE"’Q 黄褐色M(T-O
!GF= J 白色7&"*Q 绒毛状9"EE$+.LE"’Q 黄褐色M(T-O
!G>4> D 乳白略黄D,Q(;OT&"*QT"*&.E"C&*OQEE$T 薄粉状M&"-P$T#Q,LE"’Q 黄色KQEE$T
!G>4F J 白色7&"*Q 绒毛状9"EE$+.LE"’Q 黄褐色M(T-O
!GF01 ! 乳白D,Q(;OT&"*Q 毡状UQE*LE"’Q 褐色!,$T-
!G=A= D 乳白略黄D,Q(;OT&"*QT"*&.E"C&*OQEE$T 薄粉状M&"-P$T#Q,LE"’Q 黄色KQEE$T
!G/AA1 ! 乳白D,Q(;OT&"*Q 毡状UQE*LE"’Q 褐色!,$T-
!G/101 D 乳白略黄D,Q(;OT&"*QT"*&.E"C&*OQEE$T 薄粉状M&"-P$T#Q,LE"’Q 黄色KQEE$T
%"!"% 不同菌株的平均生长速度、产孢量和萌发 比最低的 !GF=要高A倍之多。产孢量越高，意味着
率比较：菌株营养生长快慢是反映菌株优良性状指 在真菌杀虫剂的工业化生产时，其生产效率越高；
标之一。由表 F 可知，1 个白僵菌菌株之间营养生 同时，在完成对寄主昆虫的侵染后，其会产生更多的
长有明显差异。以 !G>4>、!G=A= 和 !G/101 生长最 孢子以利于再次的侵染与扩散。
快，EA天时菌落直径均超过6 %;，显著高于其他6个 此外，各菌株间>A &孢子萌发率也存在着显著
菌株的菌落直径。方差分析表明该三个菌株之间无 性差异。!G>4>、!G=A= 和 !G/101 孢子平均萌发率
显著性差异，但与其他6个菌株有显著性差异，从生 高，>A &的孢子平均萌发率分别为0130>5、023=25
产性状考虑，这F个菌株优于其他菌株。 和0231F5（表F）。而特定时间内的萌发率越高，表
同时，菌株!G>4>、!G=A=和 !G/101的产孢量明 明孢子萌发速度越快，其具有的毒力可能越强。
显优于其他各菌株，其中产孢量最高的菌株 !G>4>
02C 昆虫学报 ./0%1,0232425)/%!),)/% ?0卷
表! 球孢白僵菌菌株的生长、产孢及发芽情况
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菌株 菌落直径()*)&+,%$-.".#（--） 产孢量（30145-6） 萌发率（9）
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表中数据为平均值>标准差；同列数据后不同字母表示差异显著，小写字母表示1=1?水平上的差异显著水平，大写字母表示1=10水平上的差
异显著水平。GH.,$"$%&"H."$<*.$#.-.$&>!"；"H.’.I%"H%&$D)*8-&J)**)I.,<+,%JJ.#.&"*."".#’$#.’%K&%J%D$&"*+,%JJ.#.&"；’-$***."".#’%&,%D$".’%K&%J%D$&"
,%JJ.#.&D.$"1=1?*.L.*，IH%*.D$7%"$**."".#’%&,%D$"..M"#.-.*+’%K&%J%D$&",%JJ.#.&D.$"1=10*.L.*N
7898! 不同菌株的抗旱能力：昆虫病原真菌在田 间，;<A1A的孢子萌发率达到 @@=119。随着湿度的
间应用中的最大影响因子是环境的相对湿度。过低 降低，菌株间萌发率的差异更加明显。在相对湿度
的相对湿度往往使真菌的孢子不能很好萌发，从而 /?9时，各菌株的 A2 H萌发率在 ?/=2@9 O4/=?09
极大地影响了防治效果。因此，菌株的抗旱能力是 之间；而当相对湿度降至 ?19时，;<A1A 的孢子萌
菌株筛选的重要指标之一，抗旱能力越强说明菌株 发率仍可达到 C/=?B9；综合比较各菌株萌发率，
的孢子越能在野外相对湿度低的环境中正常萌发。 ;<10的抗旱能力最弱，而 ;<A1A 的抗旱能力最强，
由图0可见：在相对湿度0119时，各菌株的孢子萌 ;<B@4和 ;<0224抗旱能力处于中等水平。
发率都较高，A2 H 萌发率在 /@=C49 O @@=119之
图0 球孢白僵菌菌株在不同相对湿度条件下的A2 H孢子萌发率
P%KN 0 ()&%,%$K.#-%&$"%)&)J,%JJ.#.&" #$%&’$()%*%++)%,% ’"#$%&’$",%JJ.#.&"#.*$"%L.H8-%,%"+（QR）
柱形图上端的字母表示各相对湿度条件下不同菌株的孢子萌发率差异程度，相同字母差异不显著，不同字母差异显著（邓肯式新复
极差检测，-S1=1?），下同。GH.*."".#’)&"H.")7)JD)*8-&’’H)I"H.’%K&%J%D$&",%JJ.#.&D.)JD)&%,%$K.#-%&$"%)&$-)&K.%KH"’"#$%&’D)-7$#.,
I%"H%&)&.)J"H."H#..,%JJ.#.&"QR’（E8&D$&’’-8*"%7*.#$&K.".’"，-S1=1?）N GH.’$-.<.*)IN
7898: 不同菌株的胞外蛋白酶产生水平：球孢白 菌株中，胞外蛋白酶产生水平均具有明显差异，
僵菌在侵入虫体的过程中，要分泌多种酶类以降解 ;<A1A、;<C2C和 ;<04@4这B个菌株胞外蛋白酶产生
昆虫体壁。胞外蛋白酶是最为重要的体壁降解酶， 水平均较高，其中 ;<A1A 产酶水平最高达 A=BC，而
与菌株的毒力密切相关。在供试的4株球孢白僵菌 ;<10胞外蛋白酶产生水平最低仅有0=1（4 图A）。
!期 刘玉军等：栎旋木柄天牛高毒力球孢白僵菌菌株的筛选 8:C
图! 不同菌株的胞外蛋白酶产生水平
"#$% ! &’()*+#,$-*.*-/0*’+)1(*--2-1)3)/+*14*/0+5*+*4+*64+)1#,4
!"! 生物测定 ;<!=!、;<>:>和 ;<8?@?菌株进行毒力测定。7个菌
!"!"# 感染症状：观察发现，感染白僵菌的栎旋木 株对栎旋木柄天牛表现出不同的致病性。在8A=B
柄天牛幼虫初期行动呆滞，身体卷缩；7天后随着病 8=CDEF浓度下，菌株 ;<!=! 对栎旋木柄天牛的侵染
情的发展，虫体全身变成褐色。死后不久虫体开始 率最高，第 8= 天开始达到 @7A7G，;<>:> 的侵染率
变硬，随后89! 天虫体长出白色絮状菌丝；后菌丝 略高于 ;<8?@?；对照未受侵染（侵染率为 =）。死亡
布满全身，直至产生白色孢子。从接种到感染、病 率、侵染率和 FH 可以反映出菌株对目标害虫的致
I=
变、死亡及产孢的整个过程中，最短的为 :天，最长 病力。死亡率和侵染率越大，致病力越强；FH 越
I=
的8:天。 小，致病力越强。;<!=!与其他菌株相比，其造成的
!"!"! 不同菌株对栎旋木柄天牛的致病力：在生 天牛死亡率最高、侵染率最高、FH 最小，因此其致
I=
物学指标测定的基础上，筛选 7 个性状良好的 病力最强（表:）。
表$ 球孢白僵菌菌株对栎旋木柄天牛幼虫的致病性
%&’()$ *&+,-.)/010+2-3+,)+)4+)5 !"#$%"&’#(#))’#*# 4+6&0/4&.&0/4+ +,-&./’)’$0)#$1"&’ (&67&)
菌株 供试虫数 幼虫死亡率F1).1-E/)+1-#+L（G） 死亡率 校正死亡率 感染率 FH
K2E<*)/0 M/)+1-#+L N/))*(+*6 O,0*(+#/, I=
J+)1#,4 -1).1*+*4+*6 :6 I6 >6 C6 8=6 8I6 （G） E/)+1-#+L（G） )1+#/（G） （6）
;<!=! 8I >AC !=A= I7A7 @7A7 @7A7 @7A7 @7A7 @!A? @7A7 IA?>
;<>:> 8I =A= =A= >AC >AC 77A7 >=A= >=A= ICA8 I7A7 87A?@
;<8?@? 8I =A= =A= =A= >AC :>AC >>AC >>AC >:A7 :>AC 8:A7=
对照NP 8I =A= =A= =A= =A= =A= >AC >AC Q =A= =A==
一种新的高毒力菌株筛选模式。
8 讨论 相关研究表明，菌落形态、产孢量等生物学指标
均与菌株的毒力有关（唐晓庆等，8@@>1；M//) !"
利用昆虫病原真菌防治农林害虫，首要关键是 #$%，8@@C）。唐晓庆等（8@@>(）发现由于菌落局变而
选择对目标害虫毒力强的菌株。现在高毒力菌株筛 表现出的菌株毒力退化现象清楚地表明了菌落形态
选的方法一般均直接通过生物测定完成。但此方法 与毒力的相关性。R1,$ 等（!==I）则从遗传的角度
最大的缺点在于工作量大且需要大量的供试昆虫用 揭示了菌株菌落形态与毒力的相关性。本实验结果
于生物测定，因此在对大规模菌株进行筛选或在供 也表明，具有较强毒力的菌株其菌落均呈现薄粉状
试昆虫数量不多的时候难以实施。因此，需要建立 质地，与其他菌株有明显差异。对于产孢量与孢子
$N- 昆虫学报 3+$"4#$)9)()<1+"61#1+" 6$卷
萌发速度等指标，蔡国贵（!""#）认为产孢量大且萌 4+$1#)&)%(1" 0.81%,* >C9 4=)9"(" )01,#$"(1*，8C A:,*>C +:JG ;:B,D*DL
发速度快的菌株对刚竹毒蛾 !"#$"#" %&’(()*$"+&’*", -1)7)#$0)(，N2：$22M$%!7
WB@@，P>C?[，$%%&7 \*J>(8:C.*(U**C*I(,>;*JJBJ>,H,:(*>D*:G -,"./,01"
具有更强的毒力。本研究中，产孢能力强且孢子萌
2"**1"#"L >).0#"()83#&.13<01+.($.0"(?#1/,0*1$’，!（# #）：!2#M!2-7
发速度快的菌株其毒力也较强，说明具有一定的相
［胡景江，樊美珍，$%%&7 球孢白僵菌胞外蛋白酶与其毒力的关
关性。
系L 安徽农业大学学报，!（# #）：!2#M!2-］
此外，已有很多研究表明，菌株产胞外蛋白酶水 )8B ’\，EB: ’@，$%-%7 5<* D(B9K :G 3%&0);1*1.9 *".$,01L >).0#"( )8
平和菌株的毒力大小有很大关系。胡景江和樊美珍 6&"#;)#<@)0,*$0’6+1,#+,"#;A,+&#)()<’，（#）：6$M667［刘世儒，
（$%%&）研究表明菌株的胞外蛋白酶产生水平与其对 郭树嘉，$%-%7 台湾柄天牛的初步研究L 山东林业科技，（#）：6$
M66］
马尾松毛虫的毒力之间存在明显的线性关系。’(
?::, Y，)>C+*U>J9 @，].:+C:C P，$%%27 QGG*;(D :G ,*<K9,>(8:C :C (<*
)*+*,等（$%--）认为菌株的蛋白酶活力与其毒力密
;:C898>J^8>.8J8(K:G 5,$"0&1B1.98("/)/101;, 4K;:H*D(8;89*G:,4BJ>(8:CDL
切相关。本研究也表明，产胞外蛋白酶水平高的菌 -1)+)#$0)(6+1L A,+&#)(L，（2 $）：-2M%N7
株对栎旋木柄天牛毒力强，这同样为菌株的筛选提 FB [)，)8 [[，$%%&7 SCD*;( ?K;:J:+KL VC<B8 ’;8*C;* >C9 5*;<C:J:+K
供了参考。 FB.J8D<8C+W:BD*，W*G*8，VC<B8L N#!MN#6［7 蒲蛰龙，李增智，$%%&7
昆虫真菌学L 安徽合肥：安徽科技出版社L N#!MN#6］
同时菌株抗旱能力强弱是评判菌株野外侵染与
’*,+8:/V，?>,;:V5，)B;8>C>’\，QC,8_B*O，!""67 -,"./,01" 2"**1"#"
生存能力的重要指标。唐晓庆等（$%%&.）研究发现，
H>(<:+*C8;8(K (: (<* ;8(,BD ,BD( 48(* !&’(()+)%$0.$" )(,1/)0"L
菌株野外应用效果与其抗旱力强弱有着重要关系。
4=%,019,#$"("#;3%%(1,;3+"0)()<’，#2：$$2M$!!7
在 - 株供试的白僵菌菌株中，最终筛选的菌株 ’<84>TB?，!""N7 QGG*;(D:G(*4H*,>(B,*:C+,:U(<:G -,"./,01"2"**1"#"P‘
/.!"!有最强的抗旱能力。黄山风景区年平均相对 !&#，>D(,>8C<8+<JK^8,BJ*C((:(<*@>H>C*D*H8C*D>UK*,，5)#)+&"9.*
湿度在-"0左右，该菌株在低湿条件下的萌发能力 "($,0#"$.*，*DH*;8>JJK 8(D (:J*,>C;* (: <8+< (*4H*,>(B,*DL 3%%(L
4#$)9)(L C))(L，#（% #）：N&%MN267
为林间的大规模应用奠定了基础。此外，下一步还
’<84>TB?，’>(:W，!""#7 QGG*;(D:GJ>,^>J>+*:C4:,(>J8(K:G 5)#)+&"9.*
需对菌株的抗紫外线能力进行研究，以便更全面地
"($,0#"$.* W:H*（O:J*:H(*,>：O*,>4.K;89>*）>G(*, >HHJ8;>(8:C :G C:C‘
衡量菌株的抗逆性。 U:^*CG>.,8; D(,8HDU8(< -,"./,01" 2"**1"#"L 3%%(L 4#$)9)(L C))(L，
本研究中，首先根据菌株的产孢量、孢子萌发速 #（- $）：$M67
度、胞外蛋白酶活性等生物学指标，筛选出了#株白 ’()*+*, \@，YB,,>C9D FA，O<>,CJ*K VA，$%--7 5<* ,:J* :G *I(,>;*JJBJ>,
;<K4:*J>D(>D* 8C ^8,BJ*C;* :G 5,$"0&1B1.9 "#1*)%(1"*, G:, 5"#;.+"
僵菌菌株，并对其进行了生物测定，从而得到了孢子
*,=$"L >L D#/,0$,20L !"$&)(L，6!：!-6M!%#7
萌发迅速、产孢能力强、抗旱能力强且对栎旋木柄天
’BC@?，5>C+ @，Y8C+ EX，$%%&7 ’(B9K :C .8:J:+8;>J G*>(B,*D :G 98GG*,*C(
牛具有高毒力的菌株 /.!"!。该菌株对林业危险性 D(,>8CD:G -,"./,01"2"**1"#"L >).0#"()83#&.13<01+.($.0"(?#1/,0*1$’，
害虫栎旋木柄天牛的侵染率达%"0以上；在孢子浓 !#（#）：!%2M#"!7［孙继美，汤坚，丁贵银，$%%&7 球孢白僵菌不
度为$1$"234)时的 )5 仅为 67-&天，具有杀虫率 同菌株生物学特性的研究L 安徽农业大学学报，!#（#）：!%2M
6"
#"!］
高和杀虫速度较快的优点，说明该菌株在今后栎旋
5>C+ab，P>C?[，)8[[，$%%&>L ’(B9K:CD>J(>(8:C:G -,"./,01"2"**1"#"，
木柄天牛的林间防治中具有巨大的应用潜力。
>C84H:,(>C(*C(:4:+*C:BDGBC+BD，DB.;BJ(B,*98C98GG*,*C( ;:C98(8:CDL
参 考 文 献（!"#"$"%&"’） 3+$"5’+)()<1+"61#1+"，$（6 #）：$--M$%&7［唐晓庆，樊美珍，李增
智，$%%&>L 球孢白僵菌继代培养中菌落局变现象及环境影响因
/89:;<=>?@，A<>;<>(:B,8>CD EE，$%-27 FB,8G8;>(8:C >C9 H,:H*,(8*D :G >C 素的研究L 真菌学报，$（6 #）：$--M$%&］
*I(,>;*JJBJ>,H,:(*>D*H,:9B;*9.K -,"./,01"2"**1"#"L 3%%(L 4#/10)#L 5>C+ ab，WB>C+ /，)8 [[，$%%&.L QGG*;( :G DB.;BJ(B,8C+ :C 9,:B+<(
51+0)21)(L，6#：$&2%M$&-N7 ,*D8D(>C;* :G -,"./,01" 2"**1"#"L >).0#"( )8 3#&.1 3<01+.($.0"(
O>8EE，!""#7 ’;,**C8C+ :G (<* DBH*,8:, D(,>8CD :G -,"./,01" 2"**1"#" :G ?#1/,0*1$’，!（# #）：!-%M!%!7［唐晓庆，黄勃，李增智，$%%&.L 继代
!"#$"#" %&’(()*$"+&’*", >C9 H,>;(8;>J >HHJ8;>(8:CL 6+1,#$1" 61(/", 培养对球孢白僵菌抗旱力的影响L 安徽农业大学学报，!#（#）：
61#1+",，#（% !）：$"!M$"-7［蔡国贵，!""#7 刚竹毒蛾白僵菌优良 !-%M!%!］
菌株筛选及生产应用研究L 林业科学，#（% !）：$"!M$"-］ 5>C+ ab，5>C+ XF，)8 [[，$%%&;L ’(,>8C 9*+*C*,>(8:C :G -,"./,01"
P*,C>C9:QR，!""&7 SC:;BJ>(8:C>C9;:J:C8T>(8:C:G;:GG**D**9J8C+D（7)88," 2"**1"#" >C9 8(D *GG*;( :C ;:C(,:J :G H8C* ;>(*,H8JJ>,，E,#;0)(19.*
"0"21+" )L）U8(< (<* GBC+>J *C(:4:H>(<:+*C -,"./,01" 2"**1"#" %.#+$"$.*L >).0#"()83#&.13<01+.($.0"(?#1/,0*1$’，!（# #）：!N&M!6#7
（VD;:4K;:(>：WKH:;,*>J*D）L 5’+)*+1,#+,，N2：!-NM!-%7 ［唐晓庆，唐燕平，李增智，$%%&;L 球孢白僵菌菌种退化及其对
W:XO，W>,,KAA，@8CW，Y:C+Z)，’>C+?)，!""!7 QC(:4:H>(<:+*C8; 马尾松毛虫防治的影响L 安徽农业大学学报，!（# #）：!N&M!6#］
C*4>(:9*D（6$,1#,0#,9" DHHL >C9 :,$,0)0&"2;1$1*2"+$,01)%&)0"）>C9> 5<:4>D Y，[*C+ [)，WB @P，VCC QW，!""N7 QGG8;>;K :G G8.*, .>C9D
GBC+BD -,"./,01"20)#<#1"0$11 G:, .8:J:+8;>J ;:C(,:J :G (<* U<8(* +,B.D， 84H,*+C>(*9 U8(< -,"./,01" 20)#<#1"0$11 ;BJ(B,*D >+>8CD( (<* VD8>C
5期 刘玉军等：栎旋木柄天牛高毒力球孢白僵菌菌株的筛选 4FC
!"#$%"&#’( )’’*!’， !"#$%#$&#’( )%(*’+$,""+- （ +"!’",*’&-： "E;-#I1#$@"=#*-1#2 8+(")9+:#’,-1’5;/+,"/,("<=,/&"#%#)5，（G）：5G
+’&-.)/01(-’）2 .+#%#)+/(%0#"1’#%，34：35673589 75M［9 俞云祥，56659 三清山景区高海拔地带的3种森林害虫
:-#$+;，<=-#$>，?-#@A，B1AA，4CCC9 +-#"#10-!-#-!/D1D"E(1EE’&’#* 记述2 江西林业科技，（G）：5G75M］
0%-&-0*’&$&"=, "E .,(23,’+( *(--+("(2 45/#-5-1,6(，48（F）：38G7 A%-#$BQ，B1=K，:=<，56669 H%’D0&’’#1#$R1&=!’#*D*&-1# "E .,(23,’+(
3C4［9 王成树，黄勃，樊美珍，李增智，4CCC9 球孢白僵菌数量性 *(--+("( *" 4#"#/&(62- (%1,’"(12-2 8#2’"(% #> ?("@+") :#’,-1’5
状的典型相关分析2 菌物系统，4（8 F）：38G73C4］ A"+3,’-+15，5（F 5）：3373S9［张立钦，刘军，吴鸿，56669 松褐天
:-#$ +;，H-&1I @>，J-/."#( K;B，566G9 +"!"#/ D’0*"&1L-*1"# "E 牛优良白僵菌菌株筛选2 南京林业大学学报，5（F 5）：3373S］
4,1(’&+7+26("+-#$%+(,1D-D1$#"E-$’1#$2 4+/’#*+#%#)5，4G4：35537
353M9 （责任编辑：黄玲巧）
N=NO，56659 H%&’’D,’01’D"EE"&’D*,’D*D1#%1$%P-!*1*=(’)’!*’DD0’#10D,"*
