Implicación de la proteasa ADAMTS1 y sus sustratos en angiogénesis y cáncer

209 Pages·2012·26.36 MB·Spanish

Centro Pfizer‐ Universidad de Granada‐ Junta de 
Andalucía de Genómica e Investigación Oncológica 
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular III e 
Inmunología de la Universidad de Granada 
Implicación de la proteasa
ADAMTS1 y sus sustratos
en angiogénesis y cáncer
Estefanía Martino Echarri 
Tesis Doctoral 
Granada, 2012
Editor: Editorial de la Universidad de Granada
Autor: Estefanía Martino Echarri
D.L.: GR 2310-2012
ISBN: 978-84--9028-177-2

JUAN CARLOS RODRÍGUEZ MANZANEQUE ESCRIBANO, Investigador principal del grupo de 
Proteasas y Matriz Extracelular en el Centro Pfizer‐ Universidad de Granada‐Junta de Andalucía 
de Genómica e Investigación Oncológica (GENYO), Granada. 

Certifica  que  ESTEFANÍA  MARTINO  ECHARRI,  Licenciada  en  Biología,  ha  realizado  bajo  su 
dirección en GENYO el trabajo de investigación titulado: “Implicación de la proteasa ADAMTS1 y 
sus sustratos en angiogénesis y cáncer”. Este trabajo de investigación reúne las condiciones 
necesarias para optar al grado de Doctor por la Universidad de Granada. 

En Granada a   de      de 2012 

VºBº del Director  La interesada 
Juan Carlos Rodríguez Manzaneque Escribano  Estefanía Martino Echarri

Agradecimientos 
En primer lugar quiero agradecer a toda mi familia su respaldo y ánimos durante la realización 
de esta Tesis. A mi madre, por convencerme de que podía conseguir lo que me propusiese. A mi 
hermano y a mi tía Milagros, por haberme visitado allí donde he ido para darme todo su apoyo y 
por lograr que no me despegue de mi gente. A mi abuela Elena, por su amor incondicional y su 
ayuda insustituible en momentos clave de mi vida. 
A mis amigos Lee y Francesca, porque han sido mi familia en Granada y por haber tenido el 
placer de descubrir junto a ellos esta hermosa ciudad. A mi cuadrilla de Munárriz, por nuestros 
viajes y vuestras visitas que siempre aportan una dosis de locura y buen humor. A mis amigas de 
Pamplona, por las geniales acogidas en las visitas a mi ciudad. A mis compañeras y amigas 
Margot y Chia‐yu, porque no me imagino Londres sin vosotras dos. 
A todos aquellos con los que compartí buenos momentos en el Institut de Recerca del Vall 
d´Hebron, en especial a mi querida Martita. A todos los compañeros de Genyo, por estos últimos 
meses de apoyo incondicional. A Luisja, por sus innumerables consejos y ayudas en la recta final 
de la tesis. A Rubén, por prestarme su ayuda con su especialidad en el laboratorio y por sus 
chascarrillos infinitos. A Suyapa, por su valiosa ayuda en el laboratorio y los buenos momentos 
fuera y dentro de Genyo. A los recién llegados, Javi y Antonio, porque siempre da gusto ver que 
tu grupo continúa en marcha cuando te vas y es un placer ver que el relevo es excepcional. A 
Carmen,  porque  gracias  a  tu  entusiasmo  y  alegría  los  años  que  hemos  compartido  en  el 
laboratorio han sido inmejorables. Muy especialmente a Juan Carlos y Mariadel, porque además 
de vuestra aportación incalculable a mi formación científica siempre habéis estado ahí. Además, 
agradeceros vuestra calidad científica, humildad y vuestro buen humor que ameniza y facilita el 
trabajo diario. 
Y finalmente a Miquel, por aceptar iniciar una historia juntos en Granada y por alegrar cada día 
de mi vida.

Nota 
A lo largo del texto se utilizarán las abreviaturas de los términos en inglés. Es debido al uso 
extendido del inglés en publicaciones científicas y al uso de abreviaturas de manera cotidiana en 
lenguaje científico. Muchos de los acrónimos en inglés son de uso general en ciencia, por lo que 
para simplificar el texto se mantendrán las abreviaturas en inglés. Al final del texto se incluye un 
apéndice en el que se detalla el nombre en español e inglés.

Índice 
RESUMEN ........................................................................................................................ 1 
ABSTRACT ........................................................................................................................ 3 
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................. 5 
1  ANGIOGÉNESIS ...................................................................................................... 7 
1.1  COMPONENTES DE LA VASCULATURA ........................................................................... 10 
1.1.1  Células endoteliales ................................................................................................ 10 
1.1.2  Reclutamiento de pericitos y estabilización de nuevos vasos ................................. 11 
1.1.3  Membrana basal vascular ...................................................................................... 13 
1.2  ANGIOGÉNESIS EN CÁNCER ............................................................................................ 14 
1.2.1  Tratamiento antiangiogénico del cáncer y resistencia ........................................... 16 
1.3  MECANISMOS ALTERNATIVOS DE VASCULARIZACIÓN................................................... 17 
1.4  MODELOS DE ESTUDIO DE LA ANGIOGÉNESIS ............................................................... 18 
1.4.1  Ensayo de retina ..................................................................................................... 19 
1.4.2  Ensayo del anillo de aorta (Aortic Ring Assay, ARA) ............................................... 20 
1.4.3  Cultivos bidimensionales y tridimensionales .......................................................... 21 
2  ENTORNO EXTRACELULAR .................................................................................... 23 
2.1  MATRIZ EXTRACELULAR .................................................................................................. 23 
2.2  MEMBRANA BASAL ......................................................................................................... 24 
2.2.1  Componentes de la membrana basal ..................................................................... 25 
2.2.2  Función de la membrana basal ............................................................................... 25 
2.2.3  Membrana basal y cáncer ...................................................................................... 26 
2.3  PROTEASAS EXTRACELULARES ....................................................................................... 27 
2.3.1  Metaloproteasas .................................................................................................... 28 
2.3.2  Inhibidores endógenos de metaloproteasas ........................................................... 30 
2.3.3  Metaloproteasas en angiogénesis y cáncer ........................................................... 31 
2.3.4  Técnicas de identificación de sustratos .................................................................. 33 
3  ADAMTS1............................................................................................................. 35 
3.1  REGULACIÓN Y ACTIVACIÓN DE ADAMTS1 .................................................................... 35 
3.2  SUSTRATOS DE ADAMTS1............................................................................................... 36 
3.3  IMPLICACIÓN DE ADAMTS1 EN ANGIOGÉNESIS ............................................................. 38 
3.4  FUNCIÓN DE ADAMTS1 EN CÁNCER Y METÁSTASIS ....................................................... 39 
3.5  MODELOS ANIMALES PARA EL ESTUDIO DE ADAMTS1 ................................................. 40 
4  NIDÓGENOS ......................................................................................................... 43