Caracterización analítica y funcional de extractos con actividad antimicrobiana obtenidos de

274 Pages·2015·7.01 MB·Spanish

by  Tomas Menor, Laura

UNIVERSIDAD MIGUEL HERNÁNDEZ DE
ELCHE

INSTITUTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR

Caracterización analítica y funcional
de extractos con actividad
antimicrobiana obtenidos de plantas
del género Cistus

Tesis Doctoral

Laura Tomás Menor
Elche (Alicante), 2015

“Soy de las que piensan que la ciencia tiene una gran belleza. Un científico
en su laboratorio no es sólo un técnico, es también un niño colocado ante
fenómenos naturales que le impresionan como un cuento de hadas.”

Marie Curie

Dr. Antonio Ferrer Montiel, Director del Instituto de Biología Molecular y Celular de la
Universidad Miguel Hernández.

DA SU CONFORMIDAD a la lectura de la Tesis Doctoral titulada: “Caracterización
analítica y funcional de extractos con actividad antimicrobiana obtenidos de plantas
del género Cistus”, presentada por Dña. Laura Tomás Menor para optar al grado de
Doctora, la cual ha sido realizada en el Instituto de Biología Molecular y Celular de la
Universidad Miguel Hernández de Elche.

Para que conste los efectos oportunos, firma el presente certificado en Elche
(Alicante), a de de 2015.

Fdo. Dr.

Dr. Vicente Micol Molina, Catedrático de la Universidad Miguel Hernández en
Bioquímica y Biología Molecular y Dr. Enrique Barrajón Catalán, Profesor Asociado de
la Universidad Miguel Hernández del departamento de Ingeniería, Área de Farmacia y
Tecnología Farmacéutica.

CERTIFICAN:
Que el trabajo de investigación que conduce a la obtención del grado de Doctora:
“Caracterización analítica y funcional de extractos con actividad antimicrobiana
obtenidos de plantas del género Cistus” que es autora Dña. Laura Tomás Menor ha
sido realizado bajo su dirección en el Instituto de Biología Molecular y Celular de la
Universidad Miguel Hernández de Elche.

Para que consten los efectos oportunos, firman el presente certificado en Elche
(Alicante) a de de 2015.

Dr. Vicente Micol Molina

Dr. Enrique Barrajón Catalán

RESUMEN
La familia Cistaceae, conocida vulgarmente como “jaras”, comprende unas 150 especies que
forman parte importante del ecosistema mediterráneo. En el presente trabajo se han
estudiado cuatro de las especies más abundantes de esta familia localizadas en el territorio
español (Cistus salviifolius, C. clusii, C. albidus y C. ladanifer), las cuales fueron recolectadas y
utilizadas para la obtención de un total de catorce extractos a través de diversos métodos de
extracción sólido-líquido, fraccionamiento mediante cromatografía líquida y métodos de
secado. Tras un análisis de la actividad antimicrobiana frente a microorganismos modelo,
E. coli y S. aureus, y del contenido polifenólico de los mismos se seleccionaron aquellos
extractos que presentaron la máxima capacidad antimicrobiana, así como un alto contenido
polifenólico y un buen rendimiento de extracción.
Esta selección ha permitido identificar la potencialidad como antimicrobiano del extracto
acuoso de C. salviifolius, el cual fue caracterizado por HPLC acoplado a espectrometría de
masas identificando un total de 48 compuestos polifenólicos entre los que destacaron los
elagitaninos y los flavonoles. Se realizó una selección de aquellos compuestos puros más
abundantes en el extracto para abordar el estudio de los posibles efectos sinérgicos entre
estos compuestos mediante la construcción del isobolograma a partir de las curvas dosis-
efecto de los compuestos individuales, encontrando, por primera vez, varias combinaciones
sinérgicas entre ácido elágico, punicalagina y derivados de flavonoles, interacciones que
podrían explicar la potente actividad antimicrobiana del extracto.
Posteriormente, se realizó un análisis cinético de la evolución del crecimiento de E. coli,
S. aureus y C. albicans en presencia de varios extractos vegetales con el objetivo de encontrar
un agente antimicrobiano de amplio espectro. Los resultados muestran que la inhibición de
S. aureus estaría asociada con la presencia de elagitaninos, ácido elágico y flavonoles,
probablemente glicosilados, y la inhibición de E. coli se correspondería más con la presencia de
flavonoles, no encontrando extractos eficaces contra el hongo levaduriforme C. albicans. Por
último, mediante la utilización de membranas modelo de E. coli y de S. aureus, se ha
encontrado que el ácido elágico y las punicalaginas tienen un efecto directo desestabilizador
de las membranas bacterianas mientras el mecanismo de acción de los flavonoles parece estar
menos relacionado con este aspecto.
En conclusión, los resultados obtenidos en la presente memoria podrían sentar las bases para
el diseño de nuevos agentes antisépticos para dermocosmética o incluso productos sanitarios
frente a cepas clínicas hospitalarias patogénicas de S. aureus como MRSA.