Avaliação dos testes e algoritmos empregados na triagem de doadores de sangue para o vírus da ...

127 Pages·2011·5.46 MB·Portuguese

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Farmflcêu\ica~
racu1d30e<1c CiênCias
Universidade de São Paulo
UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO
FACULDADE DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS
Programa de Pós-Graduação em Farmácia
Área de Análises Ciínicas
Avaliação dos testes e algoritmos empregados na triagem de
doadores de sangue para o vírus da hepatite C
Angela Maria Egydio de Carvalho Barreto
Dissertação para obtenção do grau de
MESTRE
Orientadora:
Profa. Ora. Kioko Takei
São Paulo
2004
L~t--Y-
Angela Maria Egydio de Carvalho Barreto
Avaliação dos testes e algoritmos empregados na triagem de
doadores de sangue para o vírus da hepatite C
Comissão Julgadora
da
Dissertação para obtenção do grau de Mestre
I
~ro;a. T~i
Ora. Kioko
fylentadora/presidente
:Oab
Ui/C r(C:IJ/l TO iíf/J(-LiJ ?tv'1I0
1°. examinador
.'\iÇO
ff(t[ DflIJo (!cf3IJlt bc l/A
2°. examinador
São Paulo, Cttde / ~ ,de :2(10i
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}losmeuspais
Pfavio rtfJydio de oEiveira Carva(fio "in memorian': cujo e~empfo de viáa e
tra6a(fio, trifliam até fioje meu caminfio.
VioCeta pCaza rtfJydio, que deviáo suadoença nãopôde meacompanfiarnesta
jomaáa, mas seu amor e deduação anteriores continuam sendo o aCento da
minfia viáa.
flo meuesposo
CesarflUfJusto Cortese(Jjarreto
flos meusfiIlios
~d'rifJo P,gyd'io (Jjarreto
flTUl CarofiTUl P,gyd'io (Jjarreto
Tuzgo P,gyd'io (Jjarreto
06rigad'a por toda paciência, carinlio, ajudá e incentivo, TUl realização d'este
tra6a[fio.
~pw vssou mOJ sopvy!nJ sopdvpvfl!J9o
~p OJ-plff3J
01jJViUV:J U01ff13j/;
OpuLlJ n~m OJ{
01jJViUV:J ~p OJ-plff3JVJ.lVJfj VJUOç
puLlJVYUJ'lU J{
:Meusaaradécimentos:
)f. (])ra. :Nanei)f.{ves Saffes, cfiefe dá ([)irJisão áe Sorofogia dá iFunáação cp,ó-Sangue/J{emccentro áe São
Paufopefoseuapoioinconáu:ional;semoqua{este tra6atlio nãoseriapossive[
)f. <Dra. Ledá CBassit, que muito me incentivou e mesmo átstante) foi muito presente} com o envio áos
principaisartigoscientífü:osquemuitocontri6uíramparaeÚl6oraçãoáeste tra6atlio.
)l <Dra. CEster Ceráeira Sa6ino, cfieJe áo (/)epartamento áe CBiofogia :MofecuÚlr dá iFunáação cp,ó
Sangue/J{emocentro áeSão Paufo que átsponi6i!'t.Zou seu Úl60ratório etoáo omateria{paraestapesquisa, e
muitomeapoiou.
)lo Prof ([)r(/)afton áe)f.fencariFisfierCfiamone, presúfente dá iFunáação Pró-Sangue/J{emocentro áeSão
Paufo, pefapermissãoáe rea{izareste tra6allio na Instituição.
)lo Prof ([)r. Peáro !Enrique (/)orlliiac-LÚlcer peÚl aprOTJaçãojunto à comissão científü:a para reafização
áeste tra6allio
)l (])ra. CÚluáuzCorteseCBarreto, peÚlre'visãoecorreçãoáoportuguêsáe toáootra6allio.
)1. :MárciaCorteseCBarretopeÚl re1JÍSão ecorreçãodás ~Jerências CBi6ftográJUas.
Jiffio
)lomeu <Rgárigo!EgyáioCBarreto, pefarea{ização áosdááosestatístuosáeste tra6atlio.
)4.0pessoa{áo La60ratórioáe([)iagnóstuo dáSorofogia dá iFunáação Pró-Sangue:J{emocentroáeSão Paufo
pefo tra6afFw em equipe, peÚl cofa60ração e organização áo Úl60ratório) requisitos essenciais para que os
áados dáícofetadóssirrJamáe 6asepara um tra6afFw científü:o.)f. toáos wcêsomeumuito06rigadó, :Maria
)f.parecidá áe Ofiveira CBeffesa, ([)enise áe)f.morim) :J{eúie CBaiáa, :Marcia Zaneffa çracia} iFátima ~gina
Iori1fo çarcia, :Marina)f.ngeÚl iFa'Cmn})f.na:MariaSoÚlnge áo o/a{'1@mos} :MariaáeLouráesPáosSantos,
:MariaCristinaáeSafes)f.manciodáSifrJa, )f.náréaCristianeCamposSifrJaSantos.
)los funcionários dá CBiofogia :MofecuÚlr dá iFunáação Pró-Sangue :J{emocentro áe São Paufo, peÚl
coÚl6oração eauxjfw importantes, principa{mente para a)f.nna Sfio~ :Nisfiiya e Cúíuáia Cortese CBarreto
quemuitomeajudárampara rea{ização ecompreensãodás técnuasmofecuÚlres.
)f. todós osfuncionários áa dó áepartamento áe Sorofogía áa Punáação Pró-Sangue Hemocentro áe São
Paufo, principafmente áa Triagem Sorowgúa cujo tra6aOio áe afta quafufadê mepermitiu utÚtzaroslÚuÚJs
parareafizaçãoáeste tra6aOio, eportoáo oapoioem tuáooqueprecisei
)f.osfuncionários 1W6ertaSoares áaSifva e'Marcos'Masafiaru 1(jlwak.amiperagranáe ajudó. na reafização
áas ta6efasegrájUos.
)f. Suefi áaSifva)f.quino, secretaria áa<DWisão áe Sorofogía áa Punáação Pró-Sanguej}{emocentro áeSão
Paufo, pefoincentivoeprontiáãoportuáoqueprecisei
)f. CEvefizeC060peraamizaáeepefoempenlioparameáisponi6útzaroskjtsáa1Wclie.
)f.o meu s06rinlio :Newton CEgyáio áe CarvaOio PiIlio, pefo ajudó. eprofissiona{zsmo no conserto dó meu
computaáorem momentos tão impróprios.
)f. CE(za 'Mitsu~ 1(;J.rita, CEmúo)f.kjta)f.6e, 'Mércía 'Y:Na~muraperaforça eamizaáeáuranteareafização
áeste tra6aOio.
~
1
ABREVIATURAS
aa aminoácidos
ALT alanina-aminotransferase
Anti-HBc anticorpo contra o capsídeo do vírus da Hepatite B
Anti-HCV anticorpo contra o vírus da Hepatite C
bDNA branchedDNA-based signalamplification
cDNA DNA complementar
CDC Centro de Controle e Prevenção de Doenças
CHC carcinoma hepatocelular
CO cut-off
DEPC dietil pirocarbonato
DMF dimetiI-formamida
DNA ácido desoxirribonucléico
dNTPs desoxirribonucleotídeos trifosfato
DO densidade óptica
DTT dithiothreitol
E envelope
ELISA ensaio imuno enzimático de fase sólida
ELlSA-R ELISA realizado no retorno do doador de sangue
ELlSA-T ELISA realizado na triagem dos doadores de sangue
FDA Food andDrug Administration
gp glicoproteína
HAV vírus da hepatite A
HBc antígeno core da hepatite B
HBV vírus da hepatite B
HCV vírus da hepatite C
HCC hepatocarcinoma celular
HIV vírus da imunodeficiência humana
HPT hepatite pós-transfusional
HVR região hiper variável
IB immunoblot
~
IC intervalo de confiança
IFN interferon
INO indeterminado
IgG imunoglobulina G
IR índice de reatividade
IRES internai ribosomal entry site
ISOR região de determinação de sensibilidade ao interferon
L1A® Une Immune Assay
LiPA® Une Probe Assay
NANBH hepatite não A não B
NC não codificadora
nt nucleotídeos
NEG negativo
NOB neutralização de ligação
NS não estrutural
NTP nucleotídeo trifosfatado
ORF fase de leitura aberta
OMS Organização Mundial da Saúde
p proteína
pb pares de base
PBMC células mononucleares do sangue periférico
PCR reação em cadeia da polimerase
PKR proteína kinase
POS positivo
RdRp RNA polimerase dependente de RNA
RFLP "restriction fragment length polymorphism"
RNA ácido ribonucléico
rpm rotações por minuto
RT transcriptase reversa
RS resposta sustentada
SOO superóxido dismutase
Taq Thermus aquaticus
TMA Transcrição Mediada por Amplificação