Table Of Content

N O Alexandra Kupke I T K E F N I - V Die Rolle des olfaktorischen Epithels in der D B initialen Phase der Infektion mit dem R E D neurotropen Borna disease virus I E B S L E H T I P E H C E I R S E D E L L O R E I D E K P U K A R édition scientifique D Inaugural-Dissertation zur Erlangung des Grades eines VVB LAUFERSWEILER VERLAG N A Dr. med. vet. X VVB LAUFERSWEILER VERLAG E beim Fachbereich Veterinärmedizin der Justus-Liebig-Universität Gießen STAUFENBERGRING 15 ISBN: 978-3-8359-6444-0 L D-35396 GIESSEN A VVB Tel: 0641-5599888 Fax: -5599890 [email protected] www.doktorverlag.de 9 783835 964440 édition scientifique VVB VVB LAUFERSWEILER VERLAG VERLAG Photo cover: © (cid:68)(cid:97)(cid:115)(cid:32)(cid:87)(cid:101)(cid:114)(cid:107)(cid:32)(cid:105)(cid:115)(cid:116)(cid:32)(cid:105)(cid:110)(cid:32)(cid:97)(cid:108)(cid:108)(cid:101)(cid:110)(cid:32)(cid:115)(cid:101)(cid:105)(cid:110)(cid:101)(cid:110)(cid:32)(cid:84)(cid:101)(cid:105)(cid:108)(cid:101)(cid:110)(cid:32)(cid:117)(cid:114)(cid:104)(cid:101)(cid:98)(cid:101)(cid:114)(cid:114)(cid:101)(cid:99)(cid:104)(cid:116)(cid:108)(cid:105)(cid:99)(cid:104)(cid:32)(cid:103)(cid:101)(cid:115)(cid:99)(cid:104)(cid:252)(cid:116)(cid:122)(cid:116)(cid:46) (cid:68)(cid:105)(cid:101)(cid:32)(cid:114)(cid:101)(cid:99)(cid:104)(cid:116)(cid:108)(cid:105)(cid:99)(cid:104)(cid:101)(cid:32)(cid:86)(cid:101)(cid:114)(cid:97)(cid:110)(cid:116)(cid:119)(cid:111)(cid:114)(cid:116)(cid:117)(cid:110)(cid:103)(cid:32)(cid:102)(cid:252)(cid:114)(cid:32)(cid:100)(cid:101)(cid:110)(cid:32)(cid:103)(cid:101)(cid:115)(cid:97)(cid:109)(cid:116)(cid:101)(cid:110)(cid:32)(cid:73)(cid:110)(cid:104)(cid:97)(cid:108)(cid:116)(cid:32)(cid:100)(cid:105)(cid:101)(cid:115)(cid:101)(cid:115)(cid:32) (cid:66)(cid:117)(cid:99)(cid:104)(cid:101)(cid:115)(cid:32)(cid:108)(cid:105)(cid:101)(cid:103)(cid:116)(cid:32)(cid:97)(cid:117)(cid:115)(cid:115)(cid:99)(cid:104)(cid:108)(cid:105)(cid:101)(cid:223)(cid:108)(cid:105)(cid:99)(cid:104)(cid:32)(cid:98)(cid:101)(cid:105)(cid:32)(cid:100)(cid:101)(cid:110)(cid:32)(cid:65)(cid:117)(cid:116)(cid:111)(cid:114)(cid:101)(cid:110)(cid:32)(cid:100)(cid:105)(cid:101)(cid:115)(cid:101)(cid:115)(cid:32)(cid:87)(cid:101)(cid:114)(cid:107)(cid:101)(cid:115)(cid:46) (cid:74)(cid:101)(cid:100)(cid:101)(cid:32)(cid:86)(cid:101)(cid:114)(cid:119)(cid:101)(cid:114)(cid:116)(cid:117)(cid:110)(cid:103)(cid:32)(cid:105)(cid:115)(cid:116)(cid:32)(cid:111)(cid:104)(cid:110)(cid:101)(cid:32)(cid:115)(cid:99)(cid:104)(cid:114)(cid:105)(cid:102)(cid:116)(cid:108)(cid:105)(cid:99)(cid:104)(cid:101)(cid:32)(cid:90)(cid:117)(cid:115)(cid:116)(cid:105)(cid:109)(cid:109)(cid:117)(cid:110)(cid:103)(cid:32)(cid:100)(cid:101)(cid:114)(cid:32)(cid:65)(cid:117)(cid:116)(cid:111)(cid:114)(cid:101)(cid:110)(cid:32) (cid:111)(cid:100)(cid:101)(cid:114)(cid:32)(cid:100)(cid:101)(cid:115)(cid:32)(cid:86)(cid:101)(cid:114)(cid:108)(cid:97)(cid:103)(cid:101)(cid:115)(cid:32)(cid:117)(cid:110)(cid:122)(cid:117)(cid:108)(cid:228)(cid:115)(cid:115)(cid:105)(cid:103)(cid:46)(cid:32)(cid:68)(cid:97)(cid:115)(cid:32)(cid:103)(cid:105)(cid:108)(cid:116)(cid:32)(cid:105)(cid:110)(cid:115)(cid:98)(cid:101)(cid:115)(cid:111)(cid:110)(cid:100)(cid:101)(cid:114)(cid:101)(cid:32)(cid:102)(cid:252)(cid:114)(cid:32) (cid:86)(cid:101)(cid:114)(cid:118)(cid:105)(cid:101)(cid:108)(cid:102)(cid:228)(cid:108)(cid:116)(cid:105)(cid:103)(cid:117)(cid:110)(cid:103)(cid:101)(cid:110)(cid:44)(cid:32)(cid:220)(cid:98)(cid:101)(cid:114)(cid:115)(cid:101)(cid:116)(cid:122)(cid:117)(cid:110)(cid:103)(cid:101)(cid:110)(cid:44)(cid:32)(cid:77)(cid:105)(cid:107)(cid:114)(cid:111)(cid:118)(cid:101)(cid:114)(cid:102)(cid:105)(cid:108)(cid:109)(cid:117)(cid:110)(cid:103)(cid:101)(cid:110) (cid:32)(cid:117)(cid:110)(cid:100)(cid:32)(cid:100)(cid:105)(cid:101)(cid:32)(cid:69)(cid:105)(cid:110)(cid:115)(cid:112)(cid:101)(cid:105)(cid:99)(cid:104)(cid:101)(cid:114)(cid:117)(cid:110)(cid:103)(cid:32)(cid:105)(cid:110)(cid:32)(cid:117)(cid:110)(cid:100)(cid:32)(cid:86)(cid:101)(cid:114)(cid:97)(cid:114)(cid:98)(cid:101)(cid:105)(cid:116)(cid:117)(cid:110)(cid:103)(cid:32)(cid:100)(cid:117)(cid:114)(cid:99)(cid:104)(cid:32) (cid:101)(cid:108)(cid:101)(cid:107)(cid:116)(cid:114)(cid:111)(cid:110)(cid:105)(cid:115)(cid:99)(cid:104)(cid:101)(cid:32)(cid:83)(cid:121)(cid:115)(cid:116)(cid:101)(cid:109)(cid:101)(cid:46) (cid:49)(cid:46)(cid:32)(cid:65)(cid:117)(cid:102)(cid:108)(cid:97)(cid:103)(cid:101)(cid:32)(cid:50)(cid:48)(cid:49)(cid:54) (cid:65)(cid:108)(cid:108)(cid:32)(cid:114)(cid:105)(cid:103)(cid:104)(cid:116)(cid:115)(cid:32)(cid:114)(cid:101)(cid:115)(cid:101)(cid:114)(cid:118)(cid:101)(cid:100)(cid:46)(cid:32)(cid:78)(cid:111)(cid:32)(cid:112)(cid:97)(cid:114)(cid:116)(cid:32)(cid:111)(cid:102)(cid:32)(cid:116)(cid:104)(cid:105)(cid:115)(cid:32)(cid:112)(cid:117)(cid:98)(cid:108)(cid:105)(cid:99)(cid:97)(cid:116)(cid:105)(cid:111)(cid:110)(cid:32)(cid:109)(cid:97)(cid:121)(cid:32)(cid:98)(cid:101) (cid:32)(cid:114)(cid:101)(cid:112)(cid:114)(cid:111)(cid:100)(cid:117)(cid:99)(cid:101)(cid:100)(cid:44)(cid:32)(cid:115)(cid:116)(cid:111)(cid:114)(cid:101)(cid:100)(cid:32)(cid:105)(cid:110)(cid:32)(cid:97)(cid:32)(cid:114)(cid:101)(cid:116)(cid:114)(cid:105)(cid:101)(cid:118)(cid:97)(cid:108)(cid:32)(cid:115)(cid:121)(cid:115)(cid:116)(cid:101)(cid:109)(cid:44)(cid:32)(cid:111)(cid:114)(cid:32)(cid:116)(cid:114)(cid:97)(cid:110)(cid:115)(cid:109)(cid:105)(cid:116)(cid:116)(cid:101)(cid:100)(cid:44)(cid:32) (cid:105)(cid:110)(cid:32)(cid:97)(cid:110)(cid:121)(cid:32)(cid:102)(cid:111)(cid:114)(cid:109)(cid:32)(cid:111)(cid:114)(cid:32)(cid:98)(cid:121)(cid:32)(cid:97)(cid:110)(cid:121)(cid:32)(cid:109)(cid:101)(cid:97)(cid:110)(cid:115)(cid:44)(cid:32)(cid:101)(cid:108)(cid:101)(cid:99)(cid:116)(cid:114)(cid:111)(cid:110)(cid:105)(cid:99)(cid:44)(cid:32)(cid:109)(cid:101)(cid:99)(cid:104)(cid:97)(cid:110)(cid:105)(cid:99)(cid:97)(cid:108)(cid:44)(cid:32) (cid:112)(cid:104)(cid:111)(cid:116)(cid:111)(cid:99)(cid:111)(cid:112)(cid:121)(cid:105)(cid:110)(cid:103)(cid:44)(cid:32)(cid:114)(cid:101)(cid:99)(cid:111)(cid:114)(cid:100)(cid:105)(cid:110)(cid:103)(cid:44)(cid:32)(cid:111)(cid:114)(cid:32)(cid:111)(cid:116)(cid:104)(cid:101)(cid:114)(cid:119)(cid:105)(cid:115)(cid:101)(cid:44)(cid:32)(cid:119)(cid:105)(cid:116)(cid:104)(cid:111)(cid:117)(cid:116)(cid:32)(cid:116)(cid:104)(cid:101)(cid:32)(cid:112)(cid:114)(cid:105)(cid:111)(cid:114)(cid:32) (cid:119)(cid:114)(cid:105)(cid:116)(cid:116)(cid:101)(cid:110)(cid:32)(cid:112)(cid:101)(cid:114)(cid:109)(cid:105)(cid:115)(cid:115)(cid:105)(cid:111)(cid:110)(cid:32)(cid:111)(cid:102)(cid:32)(cid:116)(cid:104)(cid:101)(cid:32)(cid:65)(cid:117)(cid:116)(cid:104)(cid:111)(cid:114)(cid:115)(cid:32)(cid:111)(cid:114)(cid:32)(cid:116)(cid:104)(cid:101)(cid:32)(cid:80)(cid:117)(cid:98)(cid:108)(cid:105)(cid:115)(cid:104)(cid:101)(cid:114)(cid:46) (cid:49)(cid:115)(cid:116)(cid:32)(cid:69)(cid:100)(cid:105)(cid:116)(cid:105)(cid:111)(cid:110)(cid:32)(cid:50)(cid:48)(cid:49)(cid:54) (cid:169)(cid:32)(cid:32)(cid:50)(cid:48)(cid:49)(cid:54)(cid:32)(cid:98)(cid:121)(cid:32)(cid:86)(cid:86)(cid:66)(cid:32)(cid:76)(cid:65)(cid:85)(cid:70)(cid:69)(cid:82)(cid:83)(cid:87)(cid:69)(cid:73)(cid:76)(cid:69)(cid:82)(cid:32)(cid:86)(cid:69)(cid:82)(cid:76)(cid:65)(cid:71)(cid:44)(cid:32)(cid:71)(cid:105)(cid:101)(cid:115)(cid:115)(cid:101)(cid:110) (cid:80)(cid:114)(cid:105)(cid:110)(cid:116)(cid:101)(cid:100)(cid:32)(cid:105)(cid:110)(cid:32)(cid:71)(cid:101)(cid:114)(cid:109)(cid:97)(cid:110)(cid:121)(cid:32) (cid:233)(cid:100)(cid:105)(cid:116)(cid:105)(cid:111)(cid:110)(cid:32)(cid:32)(cid:115)(cid:99)(cid:105)(cid:101)(cid:110)(cid:116)(cid:105)(cid:102)(cid:105)(cid:113)(cid:117)(cid:101) (cid:86)(cid:86)(cid:66)(cid:32)(cid:76)(cid:65)(cid:85)(cid:70)(cid:69)(cid:82)(cid:83)(cid:87)(cid:69)(cid:73)(cid:76)(cid:69)(cid:82)(cid:32)(cid:86)(cid:69)(cid:82)(cid:76)(cid:65)(cid:71) (cid:83)(cid:84)(cid:65)(cid:85)(cid:70)(cid:69)(cid:78)(cid:66)(cid:69)(cid:82)(cid:71)(cid:82)(cid:73)(cid:78)(cid:71)(cid:32)(cid:49)(cid:53)(cid:44)(cid:32)(cid:68)(cid:45)(cid:51)(cid:53)(cid:51)(cid:57)(cid:54)(cid:32)(cid:71)(cid:73)(cid:69)(cid:83)(cid:83)(cid:69)(cid:78) (cid:84)(cid:101)(cid:108)(cid:58)(cid:32)(cid:48)(cid:54)(cid:52)(cid:49)(cid:45)(cid:53)(cid:53)(cid:57)(cid:57)(cid:56)(cid:56)(cid:56)(cid:32)(cid:70)(cid:97)(cid:120)(cid:58)(cid:32)(cid:48)(cid:54)(cid:52)(cid:49)(cid:45)(cid:53)(cid:53)(cid:57)(cid:57)(cid:56)(cid:57)(cid:48)(cid:32) (cid:101)(cid:109)(cid:97)(cid:105)(cid:108)(cid:58)(cid:32)(cid:114)(cid:101)(cid:100)(cid:97)(cid:107)(cid:116)(cid:105)(cid:111)(cid:110)(cid:64)(cid:100)(cid:111)(cid:107)(cid:116)(cid:111)(cid:114)(cid:118)(cid:101)(cid:114)(cid:108)(cid:97)(cid:103)(cid:46)(cid:100)(cid:101) (cid:119)(cid:119)(cid:119)(cid:46)(cid:100)(cid:111)(cid:107)(cid:116)(cid:111)(cid:114)(cid:118)(cid:101)(cid:114)(cid:108)(cid:97)(cid:103)(cid:46)(cid:100)(cid:101) Aus dem Institut für Veterinär-Pathologie der Justus-Liebig-Universität Gießen Betreuerin: Prof. Dr. habil. Christiane Herden Die Rolle des olfaktorischen Epithels in der initialen Phase der Infektion mit dem neurotropen Borna disease virus INAUGURAL-DISSERTATION zur Erlangung des Grades eines Dr. med. vet. beim Fachbereich Veterinärmedizin der Justus-Liebig-Universität Gießen eigereicht von Alexandra Kupke Tierärztin aus Schwelm Gießen 2016 Mit Genehmigung des Fachbereichs Veterinärmedizin der Justus-Liebig-Universität Gießen Dekan: Prof. Dr. Dr. h.c. M. Kramer Gutachter: Prof. Dr. habil. C. Herden PD Dr. C. Rummel Tag der Disputation: 04.04.2016 (cid:2) Meiner Familie Ich erkläre: Ich habe die vorgelegte Dissertation selbständig und ohne unerlaubte fremde Hilfe und nur mit den Hilfen angefertigt, die ich in der Dissertation angegeben habe. Alle Textstellen, die wörtlich oder sinngemäß aus veröffentlichten oder nicht veröffentlichten Schriften entnommen sind, und alle Angaben, die auf mündlichen Auskünften beruhen, sind als solche kenntlich gemacht. Bei den von mir durchgeführten und in der Dissertation erwähnten Untersuchungen habe ich die Grundsätze guter wissenschaftlicher Praxis, wie sie in der "Satzung der Justus-Liebig-Universität Gießen zur Sicherung guter wissenschaftlicher Praxis" niedergelegt sind, eingehalten. (cid:2) Teile dieser Arbeit wurden bereits als Poster oder Vortrag vorgestellt: KUPKE A., AHLEMEYER B., WENISCH S., BAUMGART-VOGT E., HERDEN C. (2011). Etablierung von In-vitro-Methoden zur Charakterisierung der initialen Infektion mit dem neurotropen Borna Disease Virus. Poster auf der Sommerveranstaltung des Vereins der Freunde und Förderer der Veterinärmedizin an der Justus-Liebig-Universität Gießen, 2011. KUPKE A., WEWETZER K., AHLEMEYER B., WENISCH S., HERDEN C. (2012). Establishment of in vitro methods to study the entry of neurotropic viruses into the central nervous system (CNS) via the olfactory pathway. Poster auf dem nationalen Symposium für Zoonosefoschung der nationalen Forschungsplattform für Zoonosen, Berlin, 2012. KUPKE A., EICKMANN M., WEWETZER K., WENISCH S., HERDEN C. (2013). Untersuchungen zur initialen Phase der Infektion mit dem Borna Disease Virus (BDV). Vortrag auf der 56. Jahrestagung der Fachgruppe Pathologie der Deutschen Veterinärmedizinischen Gesellschaft, Fulda, 2013. Abstract veröffentlicht in Tierärztiche Praxis Großtiere (3/13). KUPKE A., EICKMANN M., WEWETZER K., WENISCH S., HERDEN C. (2013). Borna disease virus (BDV) as a model for neurotropic viruses with olfactory entry. Vortrag beim Neurokolloquium des Fachbereichs Veterinärmedizin der Justus-Liebig- Universität Gießen, 2013. (cid:2) Inhaltsverzeichnis (cid:2) 1. EINLEITUNG.......................................................................................................................1 (cid:2) 2. LITERATURÜBERSICHT ...................................................................................................3 (cid:2) 2.1 VIRALE EINTRITTSPFORTEN UND STRATEGIEN ZUR AUSBREITUNG INS ZNS..3 (cid:2) 2.1.1 Hämatogene Infektion des ZNS..............................................................................3 (cid:2) 2.1.1.1 Infektion von Endothelzellen.............................................................................3 (cid:2) 2.1.1.2 Permeabilitätsstörung der Blut-Hirnschranke...................................................4 (cid:2) 2.1.1.3 Leukozytenmigration (leukocyte trafficking)......................................................4 (cid:2) 2.1.1.4. Übertritt von Viren über den Plexus choroideus..............................................5 (cid:2) 2.1.2 Neurogene Infektion des ZNS.................................................................................5 (cid:2) 2.1.2.1 Eintritt über sensorische Nerven.......................................................................5 (cid:2) 2.1.2.2 Eintritt über motorische Nerven........................................................................5 (cid:2) 2.1.2.3 Intranasale Infektion des ZNS über olfaktorische Leitungsbahnen...................6 (cid:2) 2.1.3 Viren, die verschiedene Infektionswege nutzen......................................................9 (cid:2) 2.1.4 Aufnahme anderer potentiell schädlicher Agentien über das olfaktorische Epithel10 (cid:2) 2.2 AUFBAU DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS..........................................................10 (cid:2) 2.2.1 Zellen des olfaktorischen Epithels.........................................................................11 (cid:2) 2.3 DIE BORNASCHE KRANKHEIT..................................................................................16 (cid:2) 2.3.1 Klinik......................................................................................................................16 (cid:2) 2.3.2 Die natürliche Infektion des Pferdes......................................................................17 (cid:2) 2.3.3 Epidemiologie........................................................................................................18 (cid:2) 2.3.3.1 Wirtsspektrum von Bornaviren........................................................................18 (cid:2) 2.3.3.2 Verbreitung der klassischen Bornaschen Krankheit.......................................19 (cid:2) 2.3.3.3 Bornavirus-Infektion des Menschen................................................................20 (cid:2) 2.3.3.4 Reservoire von Bornaviren.............................................................................21 (cid:2) 2.3.4 Tiermodelle zur Untersuchung von Bornavirus-Infektionen...................................22 (cid:2) 2.3.4.1 Die intrazerebrale Infektion neonataler Ratten...............................................23 (cid:2) 2.3.4.2 Die intrazerebrale Infektion adulter Ratten.....................................................24 (cid:2) 2.3.4.3 Die intranasale Infektion adulter Ratten..........................................................27 (cid:2) 2.3.4.4 Die intrazerebrale Infektion von Mäusen........................................................28 (cid:2) 2.3.5 Bornaviren.............................................................................................................29 (cid:2) 2.3.5.1 Virusaufbau und Genomorganisation.............................................................30 (cid:2) 2.3.5.2 Die Proteine des BDV.....................................................................................33 (cid:2) 2.3.5.3 Der Infektionszyklus des BDV.........................................................................36 (cid:2) 2.3.5.4 Virusausbreitung in vivo und in vitro...............................................................40 (cid:2) 3. MATERIAL UND METHODEN..........................................................................................42 (cid:2) 3.1 CHARAKTERISIERUNG DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS DES PFERDES ......42 (cid:2) 3.1.1 Probengewinnung und Aufbereitung der Proben..................................................42 (cid:2) 3.1.2 Histopathologische Untersuchung.........................................................................44 (cid:2) 3.1.2.1 Quantitative Auswertung des olfaktorischen Epithels des Pferdes.................44 3.1.2.2 Untersuchung und quantitative Auswertung der Typen des olfaktorischen (cid:2) Epithels des Pferdes...................................................................................................45 (cid:2) 3.1.3 Immunhistologische Untersuchung der Pferdenasen............................................46 (cid:2) 3.1.3.1 Seren und Primärantikörper............................................................................47 (cid:2) 3.1.3.2 Tertiärantikörper und Detektionssysteme.......................................................49 (cid:2) 3.1.3.3 Immunhistologischer Nachweis von OMP (Olfactory marker protein)............49 (cid:3)(cid:2) Inhaltsverzeichnis (cid:2) 3.1.3.4 Immunhistologischer Nachweis von DCX (Doublecortin)...............................51 3.1.3.5 Immunhistologischer Nachweis von PCNA (cid:2) (Proliferating cell nuclear antigen)..............................................................................52 (cid:2) 3.1.3.6 Immunhistologischer Nachweis von TrkA (Tyrosinkinase-Rezeptor-A)..........52 (cid:2) 3.1.3.7 Immunhistologischer Nachweis weiterer Marker............................................53 (cid:2) 3.1.3.8 Semiquantitative Auswertung der Immunhistologie........................................54 (cid:2) 3.1.4 Immunhistologische Untersuchung der Rattennase..............................................55 (cid:2) 3.1.5 Statistische Datenanalyse der Charakterisierung des olfaktorischen Epithels......56 (cid:2) 3.2 EXPERIMENTELLE INTRANASALE INFEKTION VON LEWIS-RATTEN..................56 (cid:2) 3.2.1 Herstellung der Virussuspension und der Mock-Gehirnsuspension......................56 (cid:2) 3.2.1.1 Versuchstiere..................................................................................................56 (cid:2) 3.2.1.2 Versuchsbedingungen....................................................................................57 (cid:2) 3.2.1.3 BDV-Infektion..................................................................................................57 (cid:2) 3.2.1.4 Euthanasie und Sektion..................................................................................57 (cid:2) 3.2.1.5 Herstellung der Virussuspension....................................................................58 (cid:2) 3.2.2 Intranasale Infektion adulter Lewis-Ratten............................................................58 (cid:2) 3.2.2.1 Versuchstiere..................................................................................................58 (cid:2) 3.2.2.2 Versuchsbedingungen für die In-vivo-Versuche.............................................58 (cid:2) 3.2.2.3 BDV-Infektion der Versuchstiere.....................................................................58 (cid:2) 3.2.2.4 Mock-Infektion.................................................................................................59 (cid:2) 3.2.2.5 Euthanasie und Sektion..................................................................................59 (cid:2) 3.2.2.6 Gewinnung und Aufarbeitung des Probenmaterials.......................................59 (cid:2) 3.2.3 Histopathologische Untersuchung der Versuchstiere............................................61 (cid:2) 3.2.3.1 H&E-Färbung von Gehirn und Nase der Versuchstiere..................................61 (cid:2) 3.2.3.2 Auswertung.....................................................................................................61 (cid:2) 3.2.4 Immunhistologische Untersuchung der Versuchstiere..........................................61 (cid:2) 3.2.4.1 Immunhistologischer Nachweis von BDV-N...................................................61 (cid:2) 3.2.4.2 Auswertung der Immunhistologie....................................................................62 3.2.5 Immunhistologische Untersuchung des Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) (cid:2) bei BDV-infizierten und Mock-infizierten Lewis-Ratten...................................................63 (cid:2) 3.2.5.1 Auswertung.....................................................................................................63 (cid:2) 3.2.6 In-situ-Hybridisierung der Versuchstiere (ISH)......................................................63 (cid:2) 3.2.6.1 Sondenherstellung..........................................................................................64 (cid:2) 3.2.6.2 Durchführung der ISH zum Nachweis der viralen RNA..................................67 (cid:2) 3.2.6.3 ISH der Nasen und Gehirne der intranasal infizierten Ratten.........................68 (cid:2) 3.2.6.4 Auswertung der ISH........................................................................................68 (cid:2) 3.2.7 Statistische Datenanalyse der In-vivo-Infektionsversuche....................................69 (cid:2) 3.3 DISSOZIATIONSKULTUR DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS..............................70 (cid:2) 3.3.1 Etablierung der Dissoziationskultur des olfaktorischen Epithels...........................70 (cid:2) 3.3.1.1 Beschichtung der Deckgläschen.....................................................................70 (cid:2) 3.3.1.2 Kulturbedingungen..........................................................................................71 (cid:2) 3.3.1.3. Präparation der Dissoziationskultur...............................................................71 (cid:2) 3.3.2 Charakterisierung der Dissoziationskultur.............................................................73 (cid:2) 3.3.2.1 Reaktionsbedingungen der Immunfluoreszenz...............................................73 (cid:2) 3.3.2.2 Indirekte Immunfluoreszenz zur Darstellung der olfaktorischen Neurone......74 (cid:2) 3.3.2.3 Indirekte Immunfluoreszenz zur Darstellung nicht-neuronaler Zellen.............75 (cid:3)(cid:3) (cid:2)

Description:

Ich erkläre: Ich habe die vorgelegte Dissertation selbständig und ohne unerlaubte fremde. Hilfe und nur mit den Hilfen angefertigt, die ich in der Dissertation angegeben habe. Alle. Textstellen, die wörtlich oder sinngemäß aus veröffentlichten oder nicht veröffentlichten. Schriften entnommen

Alexandra Kupke PDF

271 Pages·2016·29.86 MB·German

by Kupke, Alexandra

Checking for file health...

Save to my drive

Quick download

Download

Download Alexandra Kupke PDF Free - Full Version

by Kupke, Alexandra| 2016| 271 pages| 29.86| German

Download Alexandra Kupke by Kupke, Alexandra in PDF format completely FREE. No registration required, no payment needed. Get instant access to this valuable resource on PDFdrive.to!

Free Download PDF

About Alexandra Kupke

Detailed Information

Author:	Kupke, Alexandra
Publication Year:	2016
Pages:	271
Language:	German
File Size:	29.86
Format:	PDF
Price:	FREE

Download Free PDF

Safe & Secure Download - No registration required

Why Choose PDFdrive for Your Free Alexandra Kupke Download?

100% Free: No hidden fees or subscriptions required for one book every day.
No Registration: Immediate access is available without creating accounts for one book every day.
Safe and Secure: Clean downloads without malware or viruses
Multiple Formats: PDF, MOBI, Mpub,... optimized for all devices
Educational Resource: Supporting knowledge sharing and learning

Frequently Asked Questions

Is it really free to download Alexandra Kupke PDF?

Yes, on https://PDFdrive.to you can download Alexandra Kupke by Kupke, Alexandra completely free. We don't require any payment, subscription, or registration to access this PDF file. For 3 books every day.

How can I read Alexandra Kupke on my mobile device?

After downloading Alexandra Kupke PDF, you can open it with any PDF reader app on your phone or tablet. We recommend using Adobe Acrobat Reader, Apple Books, or Google Play Books for the best reading experience.

Is this the full version of Alexandra Kupke?

Yes, this is the complete PDF version of Alexandra Kupke by Kupke, Alexandra. You will be able to read the entire content as in the printed version without missing any pages.

Is it legal to download Alexandra Kupke PDF for free?

https://PDFdrive.to provides links to free educational resources available online. We do not store any files on our servers. Please be aware of copyright laws in your country before downloading.

The materials shared are intended for research, educational, and personal use in accordance with fair use principles.